Albumin
1.생리적 의의
1)간에서 합성되는 수용성 단백질
2)혈청 단백질의 60～70% 차지
3)Albumin의 역할
⑴교질삼투압 유지
⑵생체내 화합물 (Bilirubin , 유리지방산과 결합 , 무기질 , ... ... ... 등)과 약제의 운반
⑶노폐물 , 유독물질 운반 (배설)
2.특징
1)대부분의 질환에서 감소한다
2)수용성 물질로 Ammonium sulfate {(NH4)2SO4}에 의해 침전되며 변성이 잘 된다
3)Urine에서의 요단백 (Urine Protein) 측정은 대부분 Albumin이다
3.정상치
1)Albumin : 4.2～5.4g/㎗
2)Globulin : 2.4～3.5g/㎗
⑴α1-Globulin : 0.2～0.4g/㎗
⑵α2-Globulin : 0.4～0.9g/㎗
⑶β-Globulin : 0.4～0.8g/㎗
⑷γ-Globulin : 0.7～1.3g/㎗
3)Albumin/Globulin (A/G비) : 1.1～1.7
4.Albumin = Total Protein - Globulin
5.임상적 의의
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Albumin 감소 |
Globulin 증가 |
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⑴생합성 재료의 부족 : 장관으로부터 Albumin 조성에 필요한 Amino acid가 보급되지 않는 경우 (영양불량 , 흡수장해 , 수술후 , ...등) ⑵간에서의 합성능 저하 : 중증의 간장해 ⑶혈장단백의 혈관 밖으로 탈출 : 출혈 , 화상 , 부종 , 복수 , 흉수 , 궤양 ⑷요로 배출항진 : 사구체신염 , 네프로제증후군 등 ⑸무 Albumin 혈증 |
다발성 골수종 간경변증 종양 당뇨병 만성간염 신장질환
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6.Albumin 측정법
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측정방법 |
비 색 법 |
침 전 법 | |
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HABA 법 |
BCG 법 |
염석법 | |
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원리 |
Albumin이 각종 색소와 결합하는 성질을 이용하여 측정하는 방법이다 “단백오차”를 이용한다 |
염석을 이용한다 Biuret 반응을 이용한다 | |
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Albumin은 등전점보다 Alkali쪽에서 여러 가지 음이온성 색소와 결합하는 성질이 있다 |
BCG와 Albumin의 결합은 반응계의 pH에 따라 달라서 등전점보다 Acid쪽에서 결합이 강하다 |
①1단계 : 염석 Protein + Na2SO3 → Globulin 침전 ②2단계 : 원심분리 Ether를 첨가하여 원심분리 하여 침전을 제거 ③3단계 : Biuret 반응 여액 + Biuret 시약 → Albumin 측정 ④4단계 : 555㎚에서 측정 | |
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①1단계 : Biuret 반응 Alkali 용액 하에서 (NaOH) Protein + Biuret 시약 → Violet Complex (청자색의 복합체 형성) | |||
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②2단계 : 색소첨가 Albumin + HABA 색소 → Red Color (Violet Complex) ↑ pH 6.2 ③3단계 : 480㎚에서 비색정량 |
②2단계 : 색소첨가 Albumin + BCG 색소 → Green Color (Violet Complex) ↑ pH 4.2 ③3단계 : 630㎚에서 비색정량 | ||
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시약 |
①Biuret 시약 - NaOH : pH 조절 KI : 환원제 CuSO4 : 정색시약 Rochelle salt (Sodium Potassium tartrate) : 안정제 | ||
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②HABA 색소 ③Phosphate Buffer (pH 6.2) ④Versatol : 표준액 |
②BCG 색소 ⓐ비이온성 계면활성제 (30% Brij 35)를 첨가하여 사용 ⓑBlue Color에서 Yellow Color로 변한다 ③Succinate Buffer (pH 4.2) ④Versatol : 표준액 |
②Na2SO3 : 염 ③Ether : 단백질 분리 촉진제 ④Bovine Albumin : 표준액 | |
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파장 |
480㎚ |
630㎚ |
555㎚ |
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특징 |
①HABA 색소법의 단점 ⓐ용혈이나 혼탁한 혈청은 부정확 ⓑ감도가 좋지않다 ⓒ온도에 의한 정색의 불안정 (꼭 온도는 25℃를 유지) ⓓpH 6.2 가 되어야 한다 |
①BCG 색소법의 단점 ⓐ용혈이나 혼탁한 혈청은 부정확 ⓑ감도가 좋지않다 ⓒ온도에 의한 정색의 불안정 ⓓpH 4.2 가 되어야 한다 ②비이온성 계면활성제를 사용하므로써 ⓐ시약의 맹검관 흡광도를 낮출 수 있다 ⓑ검량선의 직선화를 향상 시킬 수 있다 ⓒ반응액의 혼탁방지 |
①염석 (Salting Out) ; 단백용액에 높은 농도의 염 을 가하면 단백질이 물과 친화력을 잃고 단백분자 상호간에 결합에 의해 침전되는 현상
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기타 |
①단백오차 : 용액의 pH가 변화하지 않아도 단백질 (Albumin)에 의해 용액의 색조가 변화하는 것 “알부민오차”라고도 한다 ②Albumin 측정에 이용되는 색소 ⓐMethyl Orange ⓑHABA (4-Hydroxyazobenzene carboxylic acid) ⓒBCG (Brom Cresol Green) ⓓBCP (Brom Cresol Purple) ⓔBPB (Brom Phenol Blue) ③표준물질로서는 사람 Albumin을 써야 정확도가 좋다 ④위의 방법이외의 Albumin 측정법 ⓐTryptophan 함량법 (Hokins-Cole 반응) : Globulin 측정법 ⓑRID (Radial Immuno Diffusion) : 면역학적 측정법 ⓒElectrophoresis : 단백분획법 |
①그 밖의 방법 ⓐ용매 분획법 ; ETOH , MEOH , Acetone , Toluene 등의 용매 이용 ⓑ산 분획법 ; Sulfosalicylic acid, TCA 등의 산 이용 ②염용 (Salting In) ; 단백용액에 중성의 염을 가하면 단백질이 물과의 친화력이 강해지고 단백분자 상호간에 결합력이 약해져서 용해도가 상승한다 | |
※Na2SO3 : Sodium sulfite (아황산 나트륨) ※TCA : Trichloroacetic acid