Lipase
(LPS)
1.“Lipase”란?
1)췌장에서 분비된다
2)Triglyceride를 Glycerol과 Fatty acid로 가수분해하는 효소
3)췌장질환의 진단에 유용하다
2.Lipase의 성질
1)최저 pH 6～10
2)기질 : Fat
⑴Olive Oil
⑵Triglyceride
3)활성제
; Bile Salt , Albumin , Ca+2 , Mg+2
4)저해제
; Fatty acid , Hemoglobin , Metal ion , Aldehyde
3.정상치 : 0～1.0 Unit/㎖
4.임상적 의의
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증가 |
감소 |
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급성췌장염 만성췌장염 췌장암 요중으로의 배설장애 |
췌장적출 만성췌장염 (극기) 당뇨병 |
5.측정시 주의사항
1)실온에서 1주일간 , 냉장 (4℃)에서 3주일간 안정하다
2)황달 , 용혈 혈청은 사용할 수 없다
3)급성췌장염 발병 후 7일～10일만에 Lipase의 농도가 최고치를 이룬다
6.Lipase 측정법
1)적정법
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측정법 |
Tietz 법 |
Cherry-Crandall 법 |
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원리 |
①1단계 : 가수분해 Lipase (Serum) ↓ Olive Oil + H2O → Glycerol + Fatty acid
②2단계 : 지시약 첨가 Fatty acid에 Thymolphthalein 첨가 후
③3단계 : 적정 NaOH로 Blue Color가 될 때 까지 적정한다 (지방의 90%까지 측정) |
①1단계 : 가수분해 Lipase (Serum) ↓ Olive Oil + H2O → Glycerol + Fatty acid
②2단계 : 지시약 첨가 Fatty acid에 Phenolphthalein 첨가 후
③3단계 : 적정 NaOH로 Red Color가 될 때 까지 적정한다 (지방의 70%까지 측정) |
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기질액 |
Olive Oil |
Olive Oil |
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지시약 |
Thymolphthalein |
Phenolphthalein |
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Buffer |
Tris Buffer (pH 8.0) |
Phosphate Buffer (pH 7.0) |
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적정액 |
0.05N NaOH |
0.05N NaOH |
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최적 pH |
pH 8.0 |
pH 7.0 |
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반응시간 |
6시간 |
24시간 |
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종말 Color |
Blue |
Red |
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정상치 |
0～1 Unit/㎖ |
0～1 Unit/㎖ |
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단위 |
혈청 1㎖중에 함유된 효소가 작용하여 생성 되는 Fatty acid를 중화하는데 소비된 0.05N NaOH의 ㎖수 | |
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비고 |
Tietz 법이 Cherry-Crandall 법 보다 더 정확하다 | |
2)비탁법
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측정법 |
Shihabi-Bishop 법 |
Vogel-Zieve 법 |
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원리 |
①1단계 : 가수분해 Lipase (Serum) ↓ Olive Oil + H2O → Glycerol + Fatty acid
②2단계 : 흡광도를 이용하여 감소된 탁도를 측정 |
①1단계 : 가수분해 Lipase (Serum) ↓ Triolein + H2O → Monoolein + Oleic acid
②2단계 : 흡광도를 이용하여 감소된 탁도를 측정 |
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기질액 |
Olive Oil |
Triolein |
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최적 pH |
pH 8.8 |
pH 9.1 |
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Color |
Colorless |
Colorless |
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파장 |
340㎚ |
340㎚ |
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정상치 |
7～120 Unit/L |
50～190 Unit/L |
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비고 |
①기질액이 혈청의 Lipase에 의해 가수분해 되면 원래의 혼탁도가 감소된다 ②이 혼탁도의 감소는 Lipase의 활성과 비례하므로 혼탁도의 감소율을 광학적으로 측정 ③현재 널리 사용하고 있는 방법 | |
3)그 밖의 측정법
⑴비색법
⑵효소법