| 임상적 의의 |
항원 항체 반응에 의해 적혈구에 붙어 있는 적혈구 항체를 동정하거나 그 성상을 규명하기 위하여 적혈구
항체를 적혈구로부터
떼어내는 기법을 말합니다. 항체 용출(elution)은 에테르, 클로로퀸 또는 acid glycin을
이용하여 시행합니다.
이는 신생아 용혈성 질환 또는
용혈성 수혈부작용 등의 원인 항체 규명에 유용하게 이용됩니다.
또한 붙어있는 적혈구 항체 때문에 혈액형 검사에 어려움이 있을 때에도
이용합니다.
| 검체 |
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| 혈액(EDTA tube) | 5 mL |
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| 검 사 방 법 |
Ether Method
1)
적혈구농축액 2ml을 생리식염수로 6회 세척합니다. 마지막 세척후의 상층액을 두 시험관에
2방울씩 넣어 둡니다.
2)
세척된 적혈구 농축액과 같은 양의 diethyl ether를 시험관에 넣고 혼합합니다.
또는 농축적혈구1, 생리식염수1,
ether 2를 넣고 혼합합니다.
3) 시험관을 cork 마개로 단단히 막고 1-2 분간 강하게 진탕합니다.
4) 천천히 마개를
제거시킵니다.
5) 2500 rpm에서 5분간 원심분리한후 ether층을 버립니다.
6) 56oC 수조에서
5분간 계속흔들어 줍니다.
7) 2500 rpm에서 5분간 원심분리합니다.
8) hemoglobin으로 착색된 용출액을 새
시험관으로 옮깁니다.
9) 시험관을 37oC 수조에 두고 Dropper을 사용하여 주기적으로 섞어서 ether를
완전히 증발시킵니다.
10) 용출액과 최종 세척후의 상층액과 함께 간접항글로불린검사를 시행하여
양성일 경우
항체동정에들어갑니다.
Chloroquine Method
1) 시험관에 세척 적혈구 1 volume과 chloroquine용액 4 volume을 넣습니다.
2) 실온 2시간
항온합니다(가끔 흔들어 줍니다).
3) 원심 분리 후 상층액을 제거합니다(3000 rpm, 5분).
4) 가라앉은 혈구는 pH
7.2 PBS로 3회 세척하여 2% 부유액을 만들어 direct Coombs 시험 음성임을
확인 후 혈액형 검사에 들어 갑니다.
만일 direct Coombs 시험 양성일 경우 같은 조작을 반복합니다.
5) 상층의 용출액은 투석후 항체 동정을 합니다
참고사항
가라앉은 적혈구를 세척하여 직접
항글로불린 검사를 해서 음성일 경우 혈액형 판정에 이용할 수 있으며,
상층의 용출액은 투석 과정이 필요하므로 현재 항체 동정에 이용하지
않고 있습니다.