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작성자 달콤한소금 작성시간16.11.30 Sanger 사슬종결서열 분석법에서 맨 나중에 전기영동 하고나서 자기방사법으로 전기영동 결과를 확인해야 하기 때문에 새로 신장되는 가닥을 표지해야 합니다. 이 때 1)프라이머를 표지 할 수도 있고 2)사용하는 dNTP를 표지할 수도 있습니다.
1) 프라이머를 표지할 때는 프라이머를 인산기가 표지된 ATP를 이용하여 인산화 시킵니다. 이 때 인산화효소를 사용하게 되는데 이 효소는 ATP의 감마 인산을 옮겨줍니다. 따라서 감마인산을 방사성 동위원소로 표지하여 사용합니다.
2) 사용하는 dNTP를 표지하는 경우에는, dNTP끼리 중합될 때 첨가되는 염기의 알파인산기를 통해 연결되므로 알파인산기를 방사성 동위원소로 표지하여 사용합니당