------♡ 서로 배려하는 물화생지 ♡------ (지우지 마세용)
1. 답변 달아주신 분께 감사의 댓글은 필수!
2. 모두 볼 수 있도록 비밀댓글은 금지!
3. 답변을 받은 후 질문글 삭제하지 않기!
4. 질문 전에 검색해보기! 질문은 구체적으로!
------♡ 서로 배려하는 물화생지 ♡------ (지우지 마세용)
목적유전자 삽입을 위해, 클로닝벡터에ㅜ제한효소를 처리 후 잔기영동 밴드를 확인한다고 하는데
그 결과 2개 밴드로 나오면 삽입이 안된거 아닌가요?
왜냐하면 '점착성 말단 호환성'개념에서
' 두 정류의 제한효소 사용 시 - DNA ligase처리 후 한번 연결된 것은 다시 같은 제한효소에ㅜ의해ㅜ절단되지 못한다' 라는것 때문이라고 생각합니다 .
소중한 답변 부탁드리겠습니다 ㅜㅜ
다음검색
댓글
댓글 리스트-
답댓글 작성자Rubisco 작성자 본인 여부 작성자 작성시간 19.03.14 飛烏 선생님 ㅜㅜ
예컨대 EcoRI 한가지 효소만 사용했다면 ... 제한효소를 고려해서 생각하면 한줄이 나올것 같아요 ㅜㅜ -
답댓글 작성자飛烏 작성시간 19.03.14 Rubisco 목적유전자 기준
왼쪽 BamH1. 오른쪽 EcoR1 cut
벡터 cut
BamH1. EcoR1
연결됨.
같은 효소로 잘림.
제한자리가 안바뀌니까. -
답댓글 작성자Rubisco 작성자 본인 여부 작성자 작성시간 19.03.14 飛烏 친절하고 구체적인 해석적 설명 진심으로 감사합니다 선생님!!
-
작성자飛烏 작성시간 19.03.14 ' 두 정류의 제한효소 사용 시 - DNA ligase처리 후 한번 연결된 것은 다시 같은 제한효소에ㅜ의해ㅜ절단되지 못한다'
이것은 점착성 말단이 일치하는 다른 두 효소의 경우에 해당합니다.
한 쪽 말단만 보았을 때 EcoR1으로만 절단한 경우(벡터도 EcoR1 절단, insert DNA도 EcoR1 절단 ) 연결한 후 다시 EcoR1으로 분리할 수 있습니다.
