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Sanger 분석법 질문

작성자샌디| 작성시간24.06.10| 조회수0| 댓글 5

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  • 작성자 정틱 작성시간24.06.10 표지자가 dATP기 때문에 프라이머 바로 뒤에 dATP가 삽입된다면 이후 중합이 가능하기 때문에 문제에 제시된 (나)의 크기가 가장 작은 밴드는 나타나지 않습니다.
    ddATP가 중합된다면 크기가 가장 작은 밴드는 만들어질 수 있으나 표지자가 없기 때문에 관찰할 수 없습니다.
    따라서 (나)에 표지자를 프라이머가 아닌 dATP로 사용한다면 밴드는 4개가 관찰됩니다.
  • 답댓글 작성자 샌디 작성자 본인 여부 작성자 작성시간24.06.10 아...!!!! 정말 감사합니다 선생님 ㅠㅠ 답답하던게 풀렸어요 좋은 저녁 되세요!!
  • 작성자 화이팅하세요 작성시간24.06.12 개인적으로 문제가 이상한것 같은데..프라이머 대신에 알파인산기가 표지된 dATP를 사용한다면 맨 처음에 이것이 사용되야만 표지가 나타나고 만약에 중간에 이것이 사용된다면 알파 인산기가 제거되어 표지가 나타나지 않을 것 같네요..
    그럼 정말 맨 처음에 사용된다면 기존 프라이머를 사용하는 것과 동일한 밴드수가 나오지 않을까요??
    오류가 있다면 알려주시면 감사하겠습니다|
  • 답댓글 작성자 샌디 작성자 본인 여부 작성자 작성시간24.06.17 dNTP 중합시에 dNTP의 바깥쪽 인산기인 감마 인산기와 베타 인산기는 제거되고, 알파 인산기는 제거되지 않고 남아있는걸로 알고 있어요!

    1) 맨 처음에 dATP 사용 시
    - 알파 인산기는 dNTP끼리 중합할 때 첨가되는걸로 알고 있어요. 따라서 프라이머 다음에 dATP가 첨가되면 밴드로 나타나지 않는 것 같습니다.. 근데 이 부분은 저도 확실하지 않네요 ㅠㅠ
    2) 중간에 dATP 사용 시
    - dNTP끼리 중합 시에 피로인산이 제거되고 알파 인산기는 남아있기 때문에, 표지된 알파 인산기는 신생가닥에 계속 존재합니다. 따라서 밴드가 나타납니다.

    그래서 첫 dATP에 대해서는 밴드가 나타나지 않고, 이후 나타나는 4개의 밴드만을 관찰할 수 있습니다.
  • 답댓글 작성자 화이팅하세요 작성시간24.06.17 샌디 아…제가 인산기 순서를 거꾸로 착각했네요! 감사합니다~^^
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