"분자세포생물학" 박상대저 라이프사이언스
에 나오는 녹아웃 생쥐관련 실험입니다. 단순하게 형질전환 줄기세포로 뭉뚱거린 설명만 보다가 이 책을 보니 좀 헷깔리네요.
제가 제대로 이해한건지 확인 부탁드려요.
1.
갈색 우성 동형접합 생쥐 배아줄기 세포를
---> tk,네오마이신 선별지표가 포함된 플라스미드로 상동재조합시켜 녹아웃유전자와 정상유전자의 이형접합의 재조합 배아 형성.
2. 검은색 열성 동형접합 생쥐 배아에 이식하여 키메라 자손 생성.
3. 검은색 열성 동형접합의 개체와 키메라 생쥐 교배시,
1). 키메라 생식세포가 검은색 열성동형 배아 유래 ------> 전부 검은 생쥐(야생형) 자손 생성.
2). 키메라의 생식세포가 조작된 배아 줄기 세포 유래
-(1). 배아(2n)가 생식세포(n) 형성시 정상유전자 획득.(녹아웃 시킨 유전자의 정상형 대립유전자)
-> 갈색 이형접합자이나 녹아웃 유전자에 대해서는 정상의 동형 접합임.
-(2). 배아가 생식세포 형성시 녹아웃 유전자 획득.
->갈색 이형접합자이며, 녹아웃 유전자에 대하여도 이형접합임.(녹아웃유전자+정상대립유전자)
4. 2)-(2) 의 경우를 서던블롯팅을 이용하여 선별하고 자가수정시켜 자손 형성 한다.
5. 25%의 확률로 녹아웃된 유전자가 동형접합인 갈색 생쥐 생산. (이 또한 서던블롯팅 이용 확인가능)
제가 책을 제대로 이해한게 맞나요??-_-;;;;
다음검색