시금치 잎을 가위로 잘게 잘라 막자사발에 넣고, 엽록소 추출액(메탄올:아세톤=3:1)을 넣고 고운 입자가 되게 갈아준다.
크로마토그래피 용지를 시험관 크기에 맞게 자른 뒤, 아래 끝에서 2cm 위쪽에 출발선을 연필로 긋고, 중앙에 ․표(원점)를 한다. 엽록소 추출액을 이쑤시개로 찍어서 용지의 출발점에 직경 2-3mm정도가 되도록 20여회 반복하여 묻힌다.
시험관에 바닥으로부터 1cm정도 전개액을 넣어준다. 원점의 잎 추출액이 마르면 용지를 시험관에 넣어주고, 고무마개를 닫은 후 용매가 용지 끝에서 1cm정도 떨어진 부분까지 올라갈 때까지 전개시킨다.
전개가 끝나면 용지를 꺼내고, 용매가 휘발되어 없어지기 전에 용매전선을 연필로 표시한 뒤 Rf값을 계산한다.
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