진균류실험시 PDA배지조제시 궁금한 것이 있습니다.

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진균류(효모,곰팡이)배지는 PDA배지로 알고 있는데요,,,

Difco나 Merk등에서 조제되어 나오는 PDA(potato dextrose agar)에 증류수를 넣고 멸균후,

10%주석산을 첨가하여 pH를 3.5로 맞춰주는 것으로 알고 있습니다.

(대략 100ml의 PDA배지에 10%주석산이  약 1.8ml이 들어가는걸로 알고 있는데요..)

10%주석산 용액을 조제하여 무균적으로 가해주기위해 필터링하여 PDA배지에 넣어주는데

그 이후 pH측정기로 pH가 3.5에 맞추어졌는지 확인을 해야하는것인지..

확인과정에서 배지의 오염의 소지는 없는지...

PDA배지 조제시 Auto claving전에 10%주석산 용액을 가해서 pH를 3.5로 맞춰준 후 Auto claving을 하면 안되는지가 궁금합니다.

제가 말씀드린 배지조제법중에 잘못된 점과 궁금증에 대해 답변부탁드립니다.^^

[고공]

저는 주석산을 사용할 만큼 만들어 시험관에 넣어서 멸균한 다음 PDA 배지멸균후 클린벤치에서 좀 식었을때 주석산을 첨가 해요..
얼핏 산은 열에 약하다는 소릴 들었거든요.. 그래서 조금 식혀서 주석산 을 첨가해요.. 참고로 아무 생각 없이 넣으면 기포가 생기더라구요.. 그래서 주석산이 든 시험관을
배지가 든 삼각 플라스크 벽을 타고 주석산이 흘러 내리도록 해서 넣어요.
주석산과 배지가 잘 섞여야 하니까 삼각 플라스크를 크게 크게 흔들어 줘서 섞이게 해요..
이렇ㄱ ㅔ 하면 되는지는 모르겠지만.. 암튼 이렇ㄱ ㅔ해요 ~ㅎㅎ

[허혜진]

제 경험상 먼저 주석산을 넣어서 멸균하면 아무리 기다려도 배지가 굳지 않더군요 .. ㅎㅎ
그리고 pH 조절하지 않아도 크게 문제가 되지 않는다고 들었습니다..
지금까지 안하고 실험하구 있구요 ~
다른 식품회사 미생물 담당자한테 물어봐도 안한다고 하더군요 .. ㅎㅎ

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답변감사드립니다.. 제가 진균실험이 첨이라서 배지도 잘 만들어지지 않구해서요,,^^좋은정보감사드려요,,^^

[꼬댕이]

주석산멸균후 배지를 오토클레이브 돌린후에 100ml 1.8ml 넣으시면 되구여(오토클레이브 돌리기 전에 넣으면 굳질 않습니다 ) 그리고 배지 멸균전에 마그네틱 바(스핀바) 넣으시구여 주선산 주입시 핫플레이트 위에 넣고 살살 돌리시면 됩니다 궂이 플라스크 안흔들어도 됩니다.(기포생김) 그리구 배지 만들고 하루 이상 방치하면 산에 의해서 배지가 궂질 않아요 한번 만든양은 다 쓰시는 쪽으로..남으면 페트리 접시에 굳혀놓고 낙하균 용으로 쓰시면 됩니다 ^^ ph는 궂이 안맞혀도 된다는.....ㅋ

[첫눈에_반함]

주석산을 왜 넣을까요??

주석"산" 입니다. acid,
진균은 대부분 pH가 낮은데서 잘 자랍니다. 상대적으로 일반세균들은 pH중성에서 잘 자라고요
진균이 있다면 진균이 더 잘 자라게 하기 위해서 입니다.
또한 교차오염 방지를 위해서 이기도 합니다.