2011.11.7 SDS-PAGE 실험 예비레포트 및 실험 결과 그림 (수요일반도 예비레포트 동일하니 참고하세요)

[실험조교 이유섭]

*예비레포트 주제*

1. SDS-PAGE의 원리에 대하여 조사하시오.

2. SDS-PAGE에 들어가는 시약들의 역할에 대하여 조사하시오.
<ex. TEMED, APS(ammonium persulfate), SDS, beta-mecaptoethanol, blomophenol blue)
3. 염색 dye의 종류와 차이에 대하여 조사하시오.
<ex. Brilliant R250, silver staining 등>
4-1. 일반적인 SDS-PAGE로는 실제로 dimer 혹은 oligomer로 존재하는 단백질도 모두 monomer size로 detection 된다.
그 이유는 무엇인가?
4-2 또한 SDS-PAGE와 같은 전기영동 실험에서 응용된 기술 중 하나로써 단백질의 dimer 혹은 oligomer 와 같이 단백질 복합체 고유 size로 detection 할 수 있는 기술에 대해 조사해보자.
<ex. native PAGE, cross-linking 등>
5. stacking gel과 seperatinn(running) gel의 조성의 차이점과 역할의 차이를 조사해보자.

6. SDS의 화학 구조를 그려보고 전기영동시 SDS의 역할 최소 2가지에 대하여 조사해보자.

 *실험 결과 그림*

 <1조> maker 1번째 lane

<2조> maker 2번째 lane

<3조> maker 3번째 lane

<4조> maker 4번째 lane

*참고사항*

@ 실험에 사용된 protein은 대장균 유래의 열충격 단백질(Hsp33) 이며 molecular weight는 33kDa이다.
@ 1번 sample은 IPTG 발현 유도 전
@ 2-6은 sample은 IPTG와 ZnSo4(Hsp33은 Zn 결합 단백질이며 발현 유도시에 IPTG와 함께 첨가해주었다)로 발현 유도된 sample임.
@ Special sample ; 정제 완료된 Hsp33, 여러 size의 단백질을 섞어놓은 sample, large culture 후 sonication 전, 후 sample
@ protein Maker 제일 위에 밴드부터 100, 70, 50(가장 두꺼운 밴드),40, 30, 20, 15, 7 kDa 이다.

@ 모두 각자 하나씩 sample을 loading 하셨습니다. 그림에 자신의 밴드를 표시하시고 어떤 sample을 loading 하였는지 반드시 기재하여 주세요. 꼭!!!!!!

@ 훌륭한 discusssion 기대하겠습니다.

전체적으로 여러분들이 훌륭하게 실험 하셨습니다. 젤도 잘 만드셨고 결과도 잘 나온 것으로 보여지네요.

Hsp33 발현 밴드는 경험적으로 두개로 갈라진 것 처럼 보여질 수도 있습니다. 참고하세요.

ps. 개인적인 사정으로 레포트 공지와 결과 공지가 조금 늦어진 점 죄송합니다.