질문이 ... 기본에 관하여서라면,
급하지 않으시다면 제가 조금 정리하여 올리겠습니다.
한 14일 정도 ㅡㅡ;
아시겠지만,우선 적겠습니다.
sephadex LH-20은 겔필트레이션으로 역상이라 극성이 큰 물질이 먼저 나오구요.대표적인 실리카겔이 normal phase라면 이것에대해서 reverse phase라고 보시면됩니다. 실리카겔은 비극성용매로 먼저시작하지만 역상은 극성용매부터 시작하여 분리를 합니다. 외국웹사이트에는 normal phase가 극성용매로 분리가되고 reverse phase가 비극성용매로 분리가 된다고 설명이 되었는데, 같은 의미입니다. sephadex LH-20은 크기가 다양한 구멍의 벌집같은 하나의 포어분자가 일정한 크기로 만들어져 뭉쳐진덩어리로 본다면 사이즈가 작은분자들은 안에서 많은 포어를 거쳐 늦게나오게되며, 분자량이 큰것은 먼저 굴러 떨어져 나옵니다. 극성이 크고, 분자량이 큰 것이 먼저나오는것이지요.sephadex LH-20은 분자량 2000까지 분리에 쓰입니다.(크기베제법을 이용하면 sephadex LH-20외에 분자량 500~10000 옹그스트롱까지도 분리가능합니다.) void volumn은 레진의 1/3이라고 보시면 됩니다. 시료가 흡착되어지는 벌집안의 작은 공극(소공극)pore volume이 총 resine volumn의 1/3이구요(실제는 큰공극도 시료 분자가 차겠지요). 용매가 holding되는 공극이 또 1/3로 보는것이 일반적입니다. 구체적인 근거 data는 구해보겠습니다.^^; 이로써 Retention time을 알고 분취를 정확히 해서 분리도(C.C.Redolution)등을 수치로도 구할수가 있습니다만 HPLC사이트에서 도움을 얻으시구요.피크두개가 인접하면 분리도 R=1.5로 보고, 조금떨어져서 R=2~2.5정도는 되야 각각 분리가 가능하다고 보더군요. www.ilabguide.co.kr등..용매는 물질에따라 주로 100%Aceton 등으로 마무리합니다. 논문에 흔히 나오는 watson system도 쓰죠. 분자량으로 size-exclusion이 필요할때 G시리즈와 컴비네이션하기도 합니다. solvent를 이용해 sephadex LH-20으로 크기배제도 가능하고 gradient써서 역상으로 흘려보내는것도 가능합니다. 핵심은 용매입니다만,칼럼선택과 대기압조정^^으로 ((온도(주로 계절--;),resin degassing,resin과 물의 PH))에 따라 LH-20의 분리도는 변하므로 제현성에 유의하십시오.
자세히 다시 올리겠습니다.
이상 우선생각나는 걸 주저리 적었습니다만. 초보가 정리하는걸로 봐주시구요. 틀린거 있으면 답글좀 달아주세요. 혹시 도움이 되었다면 좋은일이겠구요. 정리한 글에 보태겠습니다.
보호될 필요가 없는 정보나 지식은 나눌수록 커진다고 생각합니다.
(__)(--)(__) 용감한 초보 나무올림.
--------------------- [원본 메세지] ---------------------
기본적인 방법이라 생각되는데요.(여러분에게는...)
sephadex LH-20을 사용하여 물질을 분리하고자 합니다.
sephadex LH-20에 대한 자료 좀 주시겠습니까?
아니면, 좋은 자료가 있는 사이트라도....
급하지 않으시다면 제가 조금 정리하여 올리겠습니다.
한 14일 정도 ㅡㅡ;
아시겠지만,우선 적겠습니다.
sephadex LH-20은 겔필트레이션으로 역상이라 극성이 큰 물질이 먼저 나오구요.대표적인 실리카겔이 normal phase라면 이것에대해서 reverse phase라고 보시면됩니다. 실리카겔은 비극성용매로 먼저시작하지만 역상은 극성용매부터 시작하여 분리를 합니다. 외국웹사이트에는 normal phase가 극성용매로 분리가되고 reverse phase가 비극성용매로 분리가 된다고 설명이 되었는데, 같은 의미입니다. sephadex LH-20은 크기가 다양한 구멍의 벌집같은 하나의 포어분자가 일정한 크기로 만들어져 뭉쳐진덩어리로 본다면 사이즈가 작은분자들은 안에서 많은 포어를 거쳐 늦게나오게되며, 분자량이 큰것은 먼저 굴러 떨어져 나옵니다. 극성이 크고, 분자량이 큰 것이 먼저나오는것이지요.sephadex LH-20은 분자량 2000까지 분리에 쓰입니다.(크기베제법을 이용하면 sephadex LH-20외에 분자량 500~10000 옹그스트롱까지도 분리가능합니다.) void volumn은 레진의 1/3이라고 보시면 됩니다. 시료가 흡착되어지는 벌집안의 작은 공극(소공극)pore volume이 총 resine volumn의 1/3이구요(실제는 큰공극도 시료 분자가 차겠지요). 용매가 holding되는 공극이 또 1/3로 보는것이 일반적입니다. 구체적인 근거 data는 구해보겠습니다.^^; 이로써 Retention time을 알고 분취를 정확히 해서 분리도(C.C.Redolution)등을 수치로도 구할수가 있습니다만 HPLC사이트에서 도움을 얻으시구요.피크두개가 인접하면 분리도 R=1.5로 보고, 조금떨어져서 R=2~2.5정도는 되야 각각 분리가 가능하다고 보더군요. www.ilabguide.co.kr등..용매는 물질에따라 주로 100%Aceton 등으로 마무리합니다. 논문에 흔히 나오는 watson system도 쓰죠. 분자량으로 size-exclusion이 필요할때 G시리즈와 컴비네이션하기도 합니다. solvent를 이용해 sephadex LH-20으로 크기배제도 가능하고 gradient써서 역상으로 흘려보내는것도 가능합니다. 핵심은 용매입니다만,칼럼선택과 대기압조정^^으로 ((온도(주로 계절--;),resin degassing,resin과 물의 PH))에 따라 LH-20의 분리도는 변하므로 제현성에 유의하십시오.
자세히 다시 올리겠습니다.
이상 우선생각나는 걸 주저리 적었습니다만. 초보가 정리하는걸로 봐주시구요. 틀린거 있으면 답글좀 달아주세요. 혹시 도움이 되었다면 좋은일이겠구요. 정리한 글에 보태겠습니다.
보호될 필요가 없는 정보나 지식은 나눌수록 커진다고 생각합니다.
(__)(--)(__) 용감한 초보 나무올림.
--------------------- [원본 메세지] ---------------------
기본적인 방법이라 생각되는데요.(여러분에게는...)
sephadex LH-20을 사용하여 물질을 분리하고자 합니다.
sephadex LH-20에 대한 자료 좀 주시겠습니까?
아니면, 좋은 자료가 있는 사이트라도....
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