폴리 페놀 함량 분석에 관하여..

[백홍석]

논문에서 갈취한 폴리 페놀 정량 법인에 여기서 사용되는
Folin-Ciocalteau시약은 어디서 구할 수 있나요
일반 과학사에 연락하면 구할 수 있습니까
아니면 다른곳에 연락을 해야 되나요
MERCK사 홈피에 검색하니 나오질 않아서 말이지요
그리고 이 방법되로 하면 폴리 페놀 함량을 분석 가능한가요



Lowry assay 정량법

Lowry등이 고안한 이 방법은 용액에 있는 단백질뿐만 아니라 건조된 시료에서도 이용될 수 있다. Biuret 반응과 phenol시약의 환원 정색반응을 병용한 방법이다. 이 방법은 감도 가 높으나 조작이 약간 복잡하다. 발색은 단백질의 종류에 따라 변동되나 미지의 시료의 경우는 주의를 하여야 한다. 특히 이 정량법은 5㎍/ml 정도의 단백질의 양을 정량 할 수 있는 대단히 민감한 방법이어서 널리 쓰이고 있다. 이 Lowry법에서는 사용하는 Folin-Ciocalteau시약에 의한 발색의 비우렛 실험에서와 마찬가지로 단백질과 알카리성 구리와의 반응에 포스포몰리브데산-포스포팅스텐산 염들이 단백질에 있는 티로신과 트립토판들에 의한 환원반응으로 생긴다. 이 두 아미노산의 함량은 단백질의 종류에 따라서 상당히 다르므로 1mg의 단백질에 대한 색의 세기가 일정하지가 않다. 표준곡선을 결정하는 데 사용한 단백질이 나타나는 색의 세기와 다를 수 있다. 그럼에도 불구하고 이 방법 은 단백질을 정제하는 과정에 있어서 단백질의 함량변화를 측정하는 데는 매우 유용한 방법이다. 염기성 상태에서 는 단백질의 펩티드결합과 복합체를 형성하고 로 환원된다. 티로 신, 트립토판, 시스테인의 R기뿐만 아니라도 Folin-Ciocalteu phenol reagent와 반응해서 환원된다. 이 reagent는 molybdenum/tungstenblue21,23,24로 천천히 환원되는 불안정한 처 음 생성물과 반응한다. 물질을 산성화하는 물질, 구리 킬레이트, 혹은 구리 환원의 원인 이 되는 힘은 이 실험에서 간섭을 받을 것이다. 단백질은 주로 티로신과 트립토판의 용량 에 따라 다른 색의 진하기를 나타낸다.
단백질을 정량 하는데 믿을 수 있는 방법이며 다를 단백질 사이에 변화가 적은 것이 장점이며 많은 방해물질이 있고 반응 속도가 느리며 시약이 불안정하고 단백질을 다시 쓸 수 없게 변하는 단점이 있다.