(필독) SDS-PAGE 실험사진 -2 (전기영동~ 결과확인)

[06 문선영]

주입한 sample을 전기영동 시킨후 결과를 확인하기 위해 염색및 탈색과정 추가했습니다.

레포트 쓰실때 참고하세요.

 전기영동 기계 설치(기계명은 확인후 올릴게요.)

 전개 시작 직후

 전개중

 전개중_

꽤 많이 진행되어 중간쯤에 보라색 band가 보입니다

 거의 다 끝나갑니다~
시료가 gel의 아랫부분에서 삐져나와 buffer로 샐때까지 끝까지 전개시킵니다.

 

전기영동이 완료되면 탱크에서 chamber를 분리합니다.

결과물

 결과물! 가장 왼쪽이 marker입니다.

 

얇은 유리판을 스파츄라로 조심스럽게 들어냅니다.

 왼쪽 모서리에 분리된거 보이시죠?^^

 stacking gel을 먼저 긁어 냅니다.

이때 stacking gel은 손상되어도 괜찮습니다. separating gel이 찢어지지 않게 주의합니다.


stacking gel 제거후, 조심스럽게 separating gel을 떼어냅니다.

separating gel이 상당히 '탱글탱글'해서 잘 찢어지진 않아요!^0^

아래 파란 시약은 [Coomassie Blue G250 staining solution] 입니다.

gel을 염색시키기 위해 Coomassie Blue G250 staining solution이 사용됩니다.

(*기기분석 첫번째 실험, bradford assay 때 쓰였던 염색약이예요^^)

 퐁당~

 

shacking incubator에 gel을 염색약에 빠뜨린 채로 1시간 방치합니다.

shacking(실온/50rpm)입니다.

[06 문선영]

레포트에 반찬통에 염색시약을 어쩌고..쓰는거 아니가?ㅋㅋㅋ

[06 이일훈]

seperating gel이 아니라 separating gel이야...

[06 문선영]

수정했습니다.

[01 김태완]

음... 내가 보고 있는 참고문헌 보니깐... SDS-PAGE 염색액이... Coomassie Brilliant Blue G-250이 아니라... Coomassie Brilliant Blue R-250 라면서.. "Bradford법에 이용되는 CBB G-250과 틀리지 않게 주의" 이렇게 적혀있는데... 같은거 써도 되는거야? ^^; 조교쌤이 올려준 자료에도 R-250 이라고 적혀있는디.. -ㅅ-;;;ㅋ

[06 문선영]

헉-_-;; 음..틀리면 어떻게 될까요?; 저거 염색할때 G250 썼었거든요; 아하하하;;