CAFE

댓글

뒤로

pcr에 대한 질문입니다.

작성자waochief| 작성시간14.05.06| 조회수390| 댓글 5

댓글 리스트

  • 작성자 잠수는내체질 작성시간14.05.10 프라이머가붙을때,재결합온도를계산하자나요~gc는한개당4도at는한개당2도정도로요~
    비특이적결합을막기위해온도설정을하는것이므로gc의재결합온도가높을수밖에없습니다~ 그래야프라이머결합특이성이증가하고 변성확률이적게되니까요~

    다음으로 재결합온도를결정한후에는 일반적으로재결합온도를30초정도유지해줍니다~ 여기서재결합온도보다낮은온도에서재결합되면프라이머가비특이적으로결합할수도있습니다~
    그래서온도를 너무 낮추는 것은오히려안좋습니다~
  • 답댓글 작성자 waochief 작성자 본인 여부 작성자 작성시간14.05.10 친절한 답변 감사합니다. 그런데 이해가 안되네요 ㅠㅠ
    온도가 높으면 잘 결합하지 않습니다. gc는 삼중결합이므로 재결합하기 더 힘들죠. at는 이중결합이므로 재결합하기 쉽고요. 그러면 at가 재결합하기 쉬우므로 재결합을 막기위해서 더 높은 온도로 해줘야 하는 것 아닙니까? 그런데 왜 2도로 더 낮죠?
  • 작성자 잠수는내체질 작성시간14.05.10 프라이머의 서열에 gc와 at가 동시에 존재한다는 것을 생각하셔야 할 것 같아요..

    만약 60도에서 프라이머서열 중 gc부분은 결합, at 부분은 떨어진 상태 그리고
    55도에서는 gc, at부분 모두 붙어있다고 생각해보아요~
    여기서 사용한 프라이머에 gc비율을 임으로 더 돌리면 (if 기존 5:5 -> 8:2)
    gc,at 모두를 특이적으로 결합시키려면 온도가 55도 보다 올라갈까요? 내려갈까요?
    당연히 55도 보다 올라가는게 맞겠지요~

    제 설명능력은 여기까지인 것 같아요 ㅎ
  • 답댓글 작성자 waochief 작성자 본인 여부 작성자 작성시간14.05.18 친절한 답변 감사합니다. 자세한 설명을 통해서
    DNA의 프라이머 길이가 길어질 수록 그리고 GC함량비가 높아질수록 반응 온도를 높여서 ~~ 비특이적 결합을 막는다~ 는 것을 이해하겠습니다.
  • 해당 댓글은 작성자와 운영진만 볼 수 있습니다.
맨위로

카페 검색

카페 검색어 입력폼
카카오 이모티콘
사용할 수 있는 카페앱에서
댓글을 작성하시겠습니까?
이동시 작성중인 내용은 유지되지 않습니다.